人CD44變體6ELISA檢測(cè)試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到
100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人乳腺癌細(xì)胞;MCF 7B
人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H209
黑人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞;RAJI
人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS
人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)
人腦瘤細(xì)胞;SF126
人腦瘤細(xì)胞;SF763
人腦瘤細(xì)胞;SF767
人皮膚黑色素瘤細(xì)胞;SK-MEL-1
人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞;SW-13
人結(jié)直腸癌細(xì)胞;T84
人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞;THP-1
人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;U251
人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;U937 [U-937]
人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823
人低分化肺腺癌細(xì)胞;GLC-82 [GLC82]
人喉癌上皮細(xì)胞;Hep-2
人纖維肉瘤細(xì)胞;HT-1080
人絨癌細(xì)胞;JEG-3
人耐VP16絨癌細(xì)胞株;JEG-3/VP16
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3-VP16-TNFa
人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;Jurkat, Clone E6-1
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BE(2)-M17
人乳腺癌細(xì)胞;MDA-MB-157
人成骨肉瘤細(xì)胞;MG-63
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H446
人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞;RPMI-8226 [RPMI8826]
人腦瘤細(xì)胞;SF17
人乳腺癌細(xì)胞;SK-BR-3
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-SH
人肝癌細(xì)胞;SMMC-7721